请教怎么从基因组里扩出又亮又好的片段

试剂盒提取的基因组,用不同的高保真酶尝试,不管是几百的短片段还是5000~7000的长片段,都没有条带或者条带很浅,无法切胶回收。引物不是软件设计的,自己拖动25bp,看tm值60左右,GC含量45-50%之间就选取了。中途也更换过引物,还是未能扩出条带。
考虑是不是模板质量太差,使用裂解液裂解快速释放DNA为模板也尝试过,仍然不出条带或者条带极浅。
很是郁闷……打算重新提基因组试试。不知道大家有没有什么建议
最后编辑于 2023-11-16 · 浏览 986