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基因组DNA提取试剂盒 原理

发布于 2020-09-20 · 浏览 2452 · IP 江苏江苏
这个帖子发布于 4 年零 224 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

请问下基因组DNA提取试剂盒里的溶液A溶液B一般是什么啊

1)样品的处理:取贴壁细胞(1×106-1×107 cells)先用胰蛋白酶消化处理,再用预冷的PBS吹打成细胞悬液,然后12,000 rpm离心1 min收集细胞,尽量除去上清,加200 μl溶液A,振荡至彻底混匀。

2)向悬浮液中加入20 μl的RNase A (10 mg/ml),55°C放置15 min。

3)加入20 μl的蛋白酶K (10 mg/ml),充分颠倒混匀,55°C水浴消化,细胞消化时间较短,组织消化时间较长,一般需要1-3 hr才能完成(鼠尾需要消化过夜)。消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止。消化完全的指标是:液体清亮及粘稠。

4)加入200 μl体积溶液B,充分颠倒混匀,如出现白色沉淀,可放置于75°C 15-30 min,沉淀即会消失,不影响后续实验。如溶液未变清亮,说明样品消化不彻底,可能导致提取的DNA量少及不纯,还有可能导致堵塞吸附柱。

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2452

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