IHC求助提问:小鼠棕脂染p53，背景很高，这是为什么？怎样又算是有信号呢？

我和师兄做的p53免疫组化，但是信号都不好。步骤大致如下:

加3%H2O2室温

孵育15min，PBS漂洗3次各3min

微波热修复抗原：柠檬酸钠微波炉煮沸,放入切片煮沸后调到低火10min，PBS漂洗3次各3min

加正常山羊血清封闭液，室温封闭45min-1h，甩掉，不洗

滴加一抗120μl，4℃过夜

甩掉一抗

PBS冲洗3次各3min

加酶标聚合物120μl，室温孵育20min.

PBS洗3次各3min

DAB显色，反应45s

PBS洗3次各3min

苏木素复染30s

冲洗苏木素

脱水

封片

图如下 请问有阳性结果吗？还有就是为什么背景那么高呀？怎么可以使片子干净一些？使信号清晰一些？