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肝组织免疫荧光细胞核染不上色

感染性疾病学医学生 · 发布于 2022-03-30 · IP 湖北湖北
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这个帖子发布于 3 年零 229 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

最近本新手刚开始做肝组织的免疫荧光(蜡块组织),结果细胞核总是染不上色,几乎看不到,请教各位大神什么原因?是肝组织核染色需要特殊处理,还是出现了什么问题。

具体实验步骤如下:

1、烤片1-2h

2、脱蜡:二甲苯10min x3次,酒精5min x4次

3、纯水洗5min x2次

4、抗原修复(EDTA煮沸7min)

5、自然放凉后PBS洗片10min x3次

6、8%山羊血清封闭1h

9、孵一抗过夜

10、PBS洗10min x2次

11、孵二抗1h(避光,此后均避光处理)

12、PBS洗10min x2次

13、加1:500 DAPI,封片

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