肝组织免疫荧光细胞核染不上色
最近本新手刚开始做肝组织的免疫荧光(蜡块组织),结果细胞核总是染不上色,几乎看不到,请教各位大神什么原因?是肝组织核染色需要特殊处理,还是出现了什么问题。
具体实验步骤如下:
1、烤片1-2h
2、脱蜡:二甲苯10min x3次,酒精5min x4次
3、纯水洗5min x2次
4、抗原修复(EDTA煮沸7min)
5、自然放凉后PBS洗片10min x3次
6、8%山羊血清封闭1h
9、孵一抗过夜
10、PBS洗10min x2次
11、孵二抗1h(避光,此后均避光处理)
12、PBS洗10min x2次
13、加1:500 DAPI,封片
















































