呼吸系统动物模型——咳嗽动物模型
呼吸系统主要疾病动物模型分为以下8类：
咳嗽动物模型、支气管哮喘动物模型、慢性支气管炎模型
肺气肿和肺心病动物模型、肺水肿动物模型、肺纤维化动物模型
肺结核病动物模型、肺硅沉着症动物模型
咳嗽是呼吸系统多种疾病的常见症状。确定受试药物的镇咳作用,可采用小鼠氨水或二氧化硫引咳法及豚鼠枸橼酸引咳法两种模型加以确定, 并与阳性药物进行同步观察。
豚鼠是筛选镇咳药(antitussives)的常用动物。小鼠和大鼠给予化学刺激虽然能诱发咳嗽，但其咳嗽与喷嚏动作很难区别，变异较大，特别是反复刺激时变异更大，故小鼠主要作为初筛镇咳药时使用。
1. 小鼠氨水引咳法
1.1造模原理
浓氨水是一种较强的化学刺激物，动物吸入氨水气雾后，刺激呼吸道感受器，引起咳嗽。
1.2 动物和主要器材
成年小鼠,性别不拘。500ml玻璃罩; 空气压缩机(或脚踏风箱)。
1.3 操作步骤
①小鼠置玻璃罩内→空气压缩机以400mmHg恒压将氨水喷入罩内→喷雾5s→记录动物咳嗽潜伏期和2min内咳嗽次数。也可用引起一半小鼠咳嗽的喷雾时间(FDT50)为指标。
②观察药物的止咳作用 小鼠按体重均分3组，每组至少15只小鼠。给药组灌服受试药，模型组灌服等体积生理盐水，阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因30mg/kg体重。灌胃给予受试药1 h后、腹腔注射给予受试药30min后开始喷雾。喷雾一定时间，终止喷雾，观察咳嗽反应。
1.4 模型评价与注意事项
① 氨水诱发小鼠咳嗽反应变异性较大,可在初筛止咳药时应用。
② 咳嗽潜伏期是指从喷入氨水开始至发生咳嗽所需的时间(秒数)。小鼠咳嗽以腹肌收缩(缩胸)，同时张大嘴为准，有时可有咳嗽声，观察必须仔细，也可用听诊。
③ 避免腹腔注射给予受试药,以免干扰动物的咳嗽反应。器听咳嗽声。
2. 小鼠二氧化硫引咳法
2.1 造模原理
二氧化硫是一种强的化学刺激物质,动物吸入其气雾后刺激呼吸道感受器,反射性引起咳嗽。无水亚硫酸钠与硫酸反应生成SO2。
2.2 操作步骤
用一带侧口的三角烧瓶,侧口通过橡皮管与球囊连接,烧瓶内盛有无水亚硫酸钠,烧瓶塞上装一滴定管,内灌硫酸，打开滴定管的活塞使硫酸滴到亚硫酸钠上，在烧瓶内产生SO2气体，气体储存于球囊内，用血管钳夹紧，应用时用注射器吸取4~10ml，注入放置实验小鼠的广口瓶内。
2.3 观察药物的止咳作用
小鼠按体重均分3组，给药组灌胃给予受试药，模型组灌胃给予等体积生理盐水，阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因30 mg/kg体重。灌胃给予受试药1 h或腹腔注射给药30 min后，将小鼠置于充满SO2的烧杯内，观察咳嗽潜伏期，按下式计算药物止咳率：
2.4 注意事项
① 烧杯内SO2的浓度要求在1:50000，该浓度足以引起咳嗽，如浓度过高(如1:10000)易造成动物中毒死亡。
② 实验中SO2产生的多少与实验室温度、无水亚硫酸钠的量关系密切，故无水亚硫酸钠的称量应准确。
③ SO2引咳的个体差异较大,实验时应尽量减少各方面误差。
3.豚鼠枸橼酸引咳法
3.1 造模原理
豚鼠吸入枸橼酸溶液喷雾后，刺激呼吸道粘膜感受器，反射性引起咳嗽。
3.2 动物和主要器材
体重200~250g豚鼠。2~4L玻璃罩; 空气压缩机。
3.3 操作步骤
① 将豚鼠置于玻璃干燥器内,用超声雾化器喷入17.5%枸橼酸雾化气5~10s，观察、记录豚鼠咳嗽潜伏期或记录5min内豚鼠的咳嗽次数。
② 观察药物的止咳作用 将豚鼠按体重随机分为3组,给药组灌胃给予受试药,模型组灌胃给予等体积生理盐水,阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因5mg/kg体重。灌胃给予受试药1 h或腹腔注射给药30min后，按上述方法引咳,评受试药的止咳效果。
3.4 模型评价与注意事项
① 豚鼠对化学性刺激物很敏感,刺激后能诱发咳嗽,动物容易得到。二氧化硫引咳法、氨水引咳法和枸橼酸引咳法是研究止咳药的三种常用方法，前二者系用小鼠，费用较低廉，适合于研究止咳药效果的初筛，确定效果后，再用豚鼠作进一步研究。
② 豚鼠的咳嗽声响亮，应以能听到声音为咳嗽。
③ 实验前1日豚鼠应预先挑选，喷雾后5 min内咳嗽次数少于10次者应予以淘汰。下期我们将全面的讲解呼吸系统疾病模型——支气管哮喘动物模型&慢性支气管炎模型各类模型造模方法、原理、操作过程及注意事项。
