请教wb实验bug

求助各位大佬，目的蛋白是CD44，买的proteintech的多克隆抗体，说明书说是80－95kDa，想确认下这个条带算不算目的条带呢？而且不知道为啥，目的条带一直跑不出来，内参是正常的，参考网上说CD44是膜蛋白，变性温度需要摸索，所以做了30－90度加热10分钟的温度梯度，附marker。