蛋白诱导表达不出来,帮帮孩子吧

首先。目的基因是转录因子,用的载体是pColdTF,连接后,转DH5a,转BL21,都没有问题,各种验证,比如菌液PCR ,质粒pcr,双酶切验证都没有问题,就是后续,扩培,➕IPTG诱导后,跑胶,(载体是48kDa,目标蛋白是28kDa,融合蛋白是76kDa),最后的结果就是没有目标条带,这是为啥啊啊啊。
扩培后OD值 0.4-0.6加IPTG到终浓度0.2mM,然后16度,诱导15-24h,2天,3天,我都试过了,就是没有。但是有一条很大的杂蛋白。



最后编辑于 2023-09-14 · 浏览 830