[求助]人外周血树突状细胞培养的详细实验步骤

我拟从人外周血分离、培养与鉴定树突状细胞，然后用于后继实验。查阅有关文献多为大概描述实验步骤，无法指导我具体的实验操作。如分离单个核细胞时外周血与淋巴细胞分离液的比例；离心速度及时间；用不用红细胞裂解液；半量换液时如何加细胞因子；促树突状细胞成熟应用TNF-a？LPS？CD40L？；如何DC培养成熟后制成供FCM检测PE-CD1a, FITC-CD86的标本？等等。
将上述分离树突状细胞中吸出的非贴壁细胞，分离出T淋巴细胞，再进行培养T淋巴细胞8天，然后与上述DC进行混合淋巴细胞反应可行吗？