[求助]请教Western Blot 中配胶的问题

我配的胶是12％的Separating Gel ,成分是：双蒸水：6.4ml、40％acrylamide 5.8ml、separating buffer :1.875ml、10％SDS：0.15ml、1.5%APS：0.75ml、TEMED：7.5ul。Stacking Gel的成分是：双蒸水：4.8ml 、40％acrylamide ：1.2ml、separating buffer ：2.5ml、10％SDS：0.1ml、1.5%APS：0.5ml、TEMED：7.5ul。按上面的配胶有一次配的胶还好，可以用。但后面好几次不知道哪里出的问题，有时候配的胶等了很久也不会凝，而有一次却凝的非常快，没配多久胶就凝了，到后面补平胶时都不能吸，因为吸出来的已经是胶了（补胶每次是等胶面出现小凹时就去补平的）。所以想请各位高手帮忙，能否指点下配胶中应该注意的问题，还有就是不知道上面配胶的成分中，哪一个是影响胶凝的快慢速度？希望能够得到各位高手的指点，在此先感谢了！