酶切位点更换后，测序正确，但诱导表达蛋白量差异不明显
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刚开始先在pET28a选择酶切位点EcoR I和HindIII插入目的基因了（质粒图谱如下），转化BL21（DE3）有大量表达，但是后来发现目的蛋白前有非目的蛋白的氨基酸表达了（实际上转录是在Nco I的ATG即开始了，不是从目的基本的ATG开始的）。所以后来换了酶切位点（Nco I和HindIII），重新转化到BL21（DE3） 中，结果无论怎样换诱导表达条件都不表达了(诱导前后表达差异不明显
)。求助，想知道问题出在哪里了
最后编辑于 2023-07-31 · 浏览 1146
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