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【求助】 聚丙酰胺凝胶电泳银染的有关问题?

最后编辑于 2022-10-09 · IP 北京北京
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这个帖子发布于 19 年零 235 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好!我做AFLP标记近一年了,DNA提取、酶切、扩增都没问题了,跑电泳及银染的技术也掌握了。
在9月份以前(室温高于20度),我做的很顺利,感觉只要扩增好,染色根本没有问题,我也没想过染色有什么难的。可最近,大概就在10月底(室温低于20度),染色一直染不好,总是很浅,甚至更差,上下还不均匀,一半深,一半浅。
我很郁闷!同样的人操作,为什么会差别这么大。有两点不同:
一是室温低了,我在想温度对染色这么大吗?我也请教过实验室的老师,都说:染色一般很稳定,他们以前冬天做就没有这种现象。
二是双丙稀酰胺,以前我都是用华美公司的进口分装,最近华美公司不买这种药品了,我在鼎国公司买的sigma分装的。不知道是不是这种药品不行,胶的质量好坏会影响染色的清晰度吗?
另附三张照片(有一张是以前染的好的,有两张是最近染的),请各位高手指点!我实在是找不到原因了。




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