双酶切连接载体和片段
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我最近在做双酶切连接，连了几次了连不上，长出来的菌落鉴定也不是。
首先是利用sac I酶和BamH I酶双酶切载体，之后胶回收进行后续连接。
然后是利用引物扩增目的片段，引物上有以上的两个酶切位点和保护碱基，扩完胶回收，之后双酶切再胶回收，进行后续连接。
连接使用的是宝生物的T4连接酶(solution I)
最近困扰了一段时间，请大家指点迷津！
谢谢！！！
最后编辑于 2022-12-11 · 浏览 2427
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