最近在做GST标签蛋白过柱，用的是天地人和的GlutathineBeads重力柱，蛋白带上GST101KD
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但是有大量蛋白在流出液里，洗脱液里丽春红染色都看不到，怀疑蛋白挂柱挂不上。用的是5ml填料规格的柱子，样品是裂解完放4℃第二天过柱的(第二天可以看到有沉淀，重悬后大部分溶解，小部分仍沉淀)，大概15ml，4℃重复过柱3遍，平衡液洗杂液洗脱液都是按照说明书配的
园子里看到说如果蛋白不挂柱可以样品孵育过夜，但是我的柱子里面的填料买回来是固定在底部的，像这样的柱子可以把样品加进去4℃过夜第二天来洗脱吗？由于填料固定，填料上方的样品会与填料结合不充分吗？
还有请问洗脱液中的谷胱甘肽可以提前配储存液吗？还是说也要现用现配？
最后编辑于 2022-11-29 · 浏览 2169
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