天狼猩红染色
天狼猩红(Sirius Red)染色
一、原理
天狼猩红(Sirius Red),又名天狼星红,是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,吸附牢固[1]。
偏振光镜检查,胶原纤维有正的单轴双折射光的属性,与天狼星红复合染色液结合后,可增强双折射,提高分辨率,从而区分不同类型的胶原纤维(Ⅰ、Ⅲ型)。
- Ⅰ型呈强橙红色或亮红色,Ⅲ型呈绿色[1]。
采用免疫组化技术(IHC)也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼猩红染色法试剂便宜,操作简单[1]。
二、操作步骤
1、石蜡切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇溶液脱水,详见免疫组织化学(IHC)。# 冷冻切片无需二甲苯脱蜡及梯度乙醇溶液脱水,其余操作相同。
2、核染:铁苏木素[1]滴染 5 min,蒸馏水洗 20s 去除多余染液,自来水洗 10 min。
- 铁苏木素储备液液与稀释液 1:1 混合,现配现用[1]。
3、天狼猩红:天狼猩红染液[1]滴染 30 min,自来水洗去多余染液。
4、梯度乙醇溶液脱水(从70%乙醇开始),二甲苯透明,各 3 min,参考免疫组织化学(IHC)。
5、中性树胶封固,同免疫组织化学(IHC)。
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参考文献
[1]改良天狼星红染色试剂盒_染色液_染色试剂_索莱宝-专业生化试剂网上商城 (solarbio.com),说明书:1655949087133902851.pdf (solarbio.com)
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 7211