siRNA丨转染后24小时细胞就长满了怎么办
最近可能天气暖了细胞疯长,一传4都基本撑死两天就要传代了。
用的lipo3000转染siRNA,说明书上让汇合度50-70%进行转染。
我是前一天晚上传代,第二天上午换无血清培养基饥饿5-6h(细胞并没死好像还是有所生长),下午用OPTI MEM转染siRNA,转染6h后换液(根据实验分组换不同配制的完全培养基)。
各位老师我的一个问题就是,转染后48-72检测蛋白水平变化,我的细胞坚持不了那么久怎么办 撑死转染后24h就长满了,根本等不到48h了,等到肯定就全挤死了
但是采用更低汇合度转染会不会效果不好?sirna是瞬转,转染后也不能传代了吧,效果差?
lipo3000和饥饿我的细胞倒是都依然长的很好