时间分辨荧光免疫层析试纸条，求救！！！
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最近在做AFB1的时间分辨荧光免疫层析试纸条，筛了一部分条件如下：
EDC/NHS 同比例15微克，活化15min
偶联ph9.5，偶联封闭时间2h，封闭液为微球体积的1/5，成分是10%BSA+10%甘氨酸。
筛选出条件后一直挺好，阴性C、T线荧光值均在12000以上，T/C大于1，目测8ppb甚至4ppb已消线，荧光值分别在1000以下，1000-1400。
但是从九月底开始准备，阴性出现T线荧光强度变弱，荧光值下降至8000左右，十月份还比较正常，从11月份开始，阴性出现T线消失，T线变弱的情况，并且更奇怪的是当时点样出现正常，静置半小时后点样T线消失，或者是当时点样无T线，放置一晚后点样有T线，过几天点又正常然后就又不正常了。并且伴随着样品垫前端微球堆积，以及流速慢的情况。
试剂、耗材一直没变过，也找了几方面原因，实在是摸不到头绪，求各位有经验、有想法的可以提出宝贵的意见，救急！！！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1945
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