关于LLC-1细胞培养的一些心得

之前,我查了很多资料,怎么养LLC-1细胞,没有查到什么具体方法,走了一些弯路,后来总算是养的比较成功,现在说一点我的心得体会,希望能给大家一些帮助吧,少走一些弯路。
首先,LLC-1细胞从上海细胞库买的,需要用DMEM高糖+进口血清养,最开始复苏的细胞就是半贴壁的,类似于球囊状细胞,我们需要把所有细胞用移液枪都吹下来,然后1000转或以下离心,千万不要超过1000转,会损伤细胞,接下来,用PBS洗1-2次,之后用胰酶消化细胞沉淀,切记一定要消化完全!用完全培养基终止消化,离心,细胞一传二即可。等培养基变黄就该传代了,几代以后,细胞基本就贴壁了,之后就长得很快了,贴壁也很好,细胞状态就调整过来了。