dxy logo
首页丁香园病例库全部版块
搜索
登录

疏水多肽如何用DMSO溶解?

发布于 2020-12-07 · 浏览 2031 · IP 安徽安徽
这个帖子发布于 4 年零 146 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体。DMSO作为冷冻保护剂经常应用于细胞库。在细胞冷冻过程中,DMSO可防止胞内/胞外晶体的形成,其工作浓度为10%。DMSO通常可与盐或血清白蛋白结合。

   疏水性多肽可以很容易地溶解在DMSO中。但DMSO可增加细胞的通透性,若多肽溶解于DMSO中则会对细胞产生毒性作用。高浓度的DMSO绝不可应用于细胞培养中。浓度为5%的DMSO即可让细胞膜溶解。大多数细胞株可以容忍0.5% DMSO,少许可以容忍1%的浓度,而不表现出严重的细胞毒性。然而原代细胞培养对其更敏感。所以如果是用原代细胞做剂量/反应曲线(可行性),其浓度应低于0.1%。

    对于某些疏水性非常高的多肽,可先尝试将其溶解在少量的DMSO(30-50ul,100%)中,然后慢慢 (一滴一滴地)将其添加到不断搅拌的水溶液如PBS或其他想要的缓冲液中,直至理想浓度。如果滴加过程中,肽溶液开始变浑浊,说明已经达到了溶解极限。另外,超声波有助于多肽溶解,但在使用超声处理要注意超声会引起溶液发热从而造成多肽降解,所以必须在冰上操作。

经验:

  对几乎所有的细胞来说,浓度为0.1%DMSO是安全的。

  广泛被用于细胞培养的DMSO终浓度为0.5%,不会引起细胞毒性。

  虽然对部份细胞来说,1%DMSO也不会产生细胞毒性,但我们推荐0.5%。

   也有5%DMSO成功地应用于某些细胞的案例。

  始终保持终浓度在0.5%,但储存时可200倍高浓度溶于100%的DMSO中。

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2031

回复9 点赞

全部讨论0

默认最新
avatar
分享帖子
share-weibo分享到微博
share-weibo分享到微信
认证
返回顶部