[原创]博来霉素诱导大鼠肺纤维化造模技术要点

1.配药及术前准备

• 测量SD大鼠体重（大鼠体重增长非常快，大约1周能增加20-40g），术前禁食12h
• 麻醉药物准备：水合氯醛 5% 按照0.7mL/100g 腹腔注射；异氟烷棉球用45mL EP管装好（作为吸入麻醉备用，这点很重要）
• 博来霉素(Bleomycin,BLM）： BLM（我们是用的国产，日本产的买不到） 1w5单位/支=15mg/支 配上6ml 生理盐水，最终博来霉素浓度为2.5mg/mL ，按照 体重*5mg/kg气管注入给药 （平均每只SD大鼠体重180-200g，给药约0.36-0.4ml）
• 器械：固定板，直镊2把 小弯镊2把 直尖剪刀1把  小尖剪刀1把  碘伏棉球、无菌棉球、含有BLM的1ml注射器（抽液时先预留0.3ml空气，再吸入BLM溶液，此方法可以使大鼠肺部张开，能更好的浸润药物，且减少老鼠呛咳，避免药物漏出）

2.手术

• 大鼠麻醉后仰卧位固定，头部后仰使气管稍微蹦紧。
• 碘伏棉球消毒，切口位置选择颈部正中线上胸骨角上方0.5cm。
• 使用镊子绷紧皮肤（水平线上、左右相反方向），纵向剪开皮肤、筋膜（横向容易剪断气管，且建议用大剪刀，小剪刀切口太小且多次使用损伤反而更大）。
• 依次暴露夹肌下缘、二腹肌后腹或胸骨舌骨肌（注：切口偏上则是二腹肌后腹，切口偏下则是胸骨舌骨肌，这两块肌肉背侧即是气管，需特别小心，建议先用小弯镊提起气管前方组织，用小尖剪刀挑开），可见气管的环状软骨。（注：若清晰地看到随着呼吸而上下搏动的气管，也可以不用过多暴露气管前方的软组织）。
• 确认气管位置后，助手用小弯镊于气管左右两侧轻微抵夹固定。
• 主刀者于两环状软骨之间进针，感觉到落空感后，针尖略微上挑，回抽无阻力后，快速注入BLM溶液。
• 助手立即将固定板抬高（避免大鼠将药物咳出），同时主刀缝合皮肤（一针即可，大鼠愈合能力很强）。

3.术后管理

缝合完毕后，再次碘伏消毒切口，将大鼠上半身抬高60°放置一旁，同时注意保暖。