类器官干货
类器官作为有望冲击诺贝尔奖的前沿技术,目前还属于探索阶段。话不多说直接干货。
目前肠类器官培养是相对较为成熟的。总结培养的经验供大家参考。
以小鼠为例:
为了对比不同周龄的小鼠对类器官培养的影响,分别选做了2周和6周的小鼠。本以为2周小鼠其干性更强,肠道菌群相对较好。一共做了两批,其类器官都是在过夜后就观察到了类器官生长。
一:2周和6周的小鼠各自一只。
1. 分别取小肠靠上部位约2.5cm进行培养,由于担心会出现污染,直接高倍双抗,庆大霉素配置的PBS进行多次冲洗,刮去肠绒毛,剪碎。
2. 然后5mM的EDTA-2NA4度下消化。文献都说25min左右(我做的两批都是大约10mi)。显微镜下观察到明白显得隐窝。,然后离心清洗两次就可以进行铺板。
3. 4只老鼠一共都冻存了15管,量还是很多的,而且只是P0代,如果要是P1代差不过20管没问题,可以省好多精力和钱
















































