【求助】同源重组敲基因，出现假阳性
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说是"假阳性"可能有点奇怪，情况是，转染后，筛选基因成功导入并表达，但拟敲除基因依旧还在。
用的是醋酸锂转染法来敲光滑念珠菌(单倍体dna)，敲除组件(a＋x＋b)，目标基因的上游a为850bp，下游b有750bp，筛选基因x为NAT(抗诺尔斯菌素基因，1800bp)。重复转染多次转染后好不容易在诺尔斯菌素板(筛选平板)上长出来一株菌，但是提取基因pcr后发现，NAT基因和拟敲除的基因都在，完全想不通为什么会这样，求大佬指点一下，非常感谢！！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2252
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