WB抗体选择
发布于 2020-08-26 · 浏览 1.3 万 · IP 湖北湖北
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最近要买WB抗体，大概总结了怎么选择一抗和二抗，希望能够帮到大家
一抗来说IgG是最为常用的，选择步骤如下：
1.在各大抗体公司官网搜索目的基因（R&D、CST、abcam、abconal、sigama等）
2.选择样本种属，也就是反应物种或者反应性（Reactivity），一般有human（人）、rat（大鼠）、mouse（小鼠）三种，根据需要选择
注：宿主物种与反应物种不能为一种，宿主物种有Rabbit、Mouse、Human、Rat等，例如：检测小鼠样本蛋白，则不应选择小鼠或大鼠源的一抗，而是选兔源的一抗，二抗则可选择偶联了检测分子（酶、荧光素、生物素等）的抗兔IgG。
3.选做什么实验，也就是应用（Application），主要有WB（western blot）、IHC/IF（免疫荧光）、IP（免疫共沉淀）、IHC-Fr(冰冻切片免疫荧光)、IHC-P(石蜡切片免疫荧光)，根据需要选用
4.抗体分为单克隆抗体和多克隆抗体，单克隆抗体特异性好但是灵敏度差，几乎没有杂带，多克隆抗体特异性差，灵敏度高，经常有杂带
二抗的选择则由一抗来决定
1.一抗的宿主物种：
根据一抗的宿主物种选择相应的抗该物种的二抗。如果一抗是兔源的，就要选择抗兔的二抗。
2.一抗的类型：
二抗要与一抗的类别或者亚类对应，比如说一抗是IgG蛋白，二抗就应该选择抗IgG抗体。
3.二抗偶联标记：
WB和ELISA常用酶标二抗（辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP）
组织免疫化学，细胞免疫化学，流式细胞术常用荧光基团标记的二抗（FITC, RRX, TR, PE）
免疫组化也可以使用酶标二抗
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1.3 万
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