western blot不同目的蛋白抗体孵育在同一位置出现明显条带

大神求助啊！western blot做了很久了，一直都出不了目的蛋白的条带，下面是我这次做的结果，目的蛋白和大小都标注在图上了，奇怪的是我用不同的抗体孵育，但是在同一位置出现了条带，有几种抗体还是单克隆抗体，MRP2（174KD）这么大的蛋白都在50KD附近出现了那个奇怪的条带，这个是异常条带吗，我要的条带是又没有跑出来吗？能不能说说这种是什么原因，谢谢大家！拜托拜托！

上样量：50μg（酶抑制剂是cocktail类，蛋白提取后就立即加loading buffer变性了）

电泳：5%上层胶，8%下层胶，80V一直跑到底

转膜：220mA，90min

封闭：5%脱脂奶粉，4h

一抗：有单抗，有多抗，标注见图，4℃过夜

二抗：室温，1h

洗膜：每次洗膜条件都是10min/次，洗5次