构建表达载体后，菌液PCR无条带，但送测序是正确的

我现在构建了pcambia1305的植物表达载体，双酶切载体和我的目的片段后连接，菌液PCR无条带，然后随机送测了两个菌液结果小时目的条带和载体已经连上了，可是为什么菌液PCR没有条带呢。载体引物和目的片段的引物都试过了。都没条带。