乳糖的薄层做不出来,求助各路大神!
本人在检验乳糖时,用薄层色谱爬板子,发现其做不出来.主要方法为下:
稀释剂:甲醇-水=3:2
展开剂:二氯乙烷-冰醋酸-甲醇-水=50:25:15:10
标准溶液A:取USP一水乳糖标准品适量,加入稀释剂溶解制成每1ml含0.5mg的溶液。
标准溶液B:密称取USP蔗糖标准品、USP一水乳糖标准品、USP果糖标准品、USP葡萄糖标准品,加稀释剂制成1ml中分别含上述标准品0.5mg的溶液。
供试溶液:取约25mg的一水乳糖,加入稀释剂溶解并稀释至刻度,摇匀。
操作:分别取标准溶液A、标准溶液B、供试液各2μl点样于覆盖有0.25mm硅胶G的薄层板上,在展开剂中展开,取出薄层板,在室温中干燥,在新的展开剂中再次展开,取出薄层板,标出溶液的前沿,在室温中干燥,立即用含0.5g百里酚的由95ml乙醇和5ml硫酸混和而成的溶液喷雾,在130℃干燥10分钟,供试液中的主斑点和Rf值应与标准溶液A中的相一致。标准溶液B应显示四个清晰看得出的斑点,忽略在原点的任何点,则本次试验有效。
但是每次做实验时标准溶液B总是只有三个点,请高人指点一下,都点了二十几个板了
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 5348