免疫组化DAB显色苏木素复染完之后到底要不要脱水和透明?
我是第一次做免疫组化,准备的也不是特别充分,一波三折坐下来,出现很多问题,大家多多交流,互相学习
实验步骤:
复染1min,水洗。70% ,80% , 90% 的酒精各浸泡10s,无水乙醇浸泡10s,二甲苯浸泡5min。中间没有间隔,二甲苯跑完后,就拿去用中性树脂封片。
第一次镜下观察:复染水洗之后观察没有气泡产生
第二次镜下观察:刚封完片观察没有气泡
第三次镜下观察:封完片室温晾干,第二天观察,有很多很多的气泡
问题:
1.为什么会产生气泡,是我封片没有封好,那为什么刚封上时没问题呢,还是树胶变干的过程中导致的
2.脱水透明封片的目的是什么?达到长期保存的效果吗?大概能保存多长时间,如果不脱水透明封片,复染后晾干就完事,这样可以保存多长时间?
抛开三次镜下观察结果不说:
3.为什么会有那中深蓝的颜色,这算是过染吗?但是看大部分区域挺好的吧
4.后面三张图片苏木素染的效果怎么样,这样的背景是否可以
5.第五张片子为什么这么黑呢?是切片本身的原因还是操作不当导致的?