免疫荧光双标技术与酶免疫组化异同点

免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化，但它们之间也不完全相同，今天我们就跟大家一起探讨下，它们两者之间异同。

一、免疫荧光双标技术与酶免疫组化不同点：

    1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其相同。

    2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。

    3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。

    4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油：0.01M PBS （1：1）。条件许可，建议购买抗淬灭的封片液，使标本可以保存更久。

    5、荧光抗体的孵育以及后续处理需要避光。

    6、荧光抗体染色假阳性可能会多，需要分别设定阳性和阴性对照。

    二、免疫荧光技术注意事项

    1、荧光染色后一般在1h内完成观察，或于4℃保存4h，时间过长，可能会使荧光提前衰退。

    2、每次试验均需设置以下三种对照：

    （1） 阳性对照：阳性血清 荧光标记物；

    （2） 阴性对照：阴性血清 荧光标记物；

    （3） 荧光标记物对照：PBS 荧光标记物。