C57尾静脉注射的几点体会

初学C57小鼠尾静脉注射时感觉非常困难，在大家的分享帖中获得诸多帮助，现有一些想法与大家分享，希望对初学者有所帮助。有不对的地方，还请大家批评指正，谢谢！

准备：

小鼠固定器：50 mL离心管，底部塞棉花（防止小鼠移动，根据小鼠大小决定棉花塞多少）。另外，侧壁上用扎一些小孔，（防止窒息）。30 g左右的小鼠也是可以放进去的。我习惯将50 mL离心管用宽胶带粘在铁饭盒上以固定。操作过程中，调整离心管的方向，尽量让尾静脉正对着我。

胰岛素针，酒精棉球，干棉球，宽胶带。

首先，要明确C57小鼠尾静脉为什么难打，这是关键！主要是因为小鼠尾静脉比头发丝还要细，次要方面是C57小鼠表皮黑。市面上有价值千元的尾静脉注射器，利用特定光源照射静脉，以及大家常说的用50-60℃的热水泡泡尾巴，目的都是使尾静脉扩张，方面注射。前者价格贵，后者在动物房屏障里操作不便。我一般用手搓尾巴，使其扩张，以便于注射，详见这个链接的视频https://www.biomart.cn/experiment/430/431/658/2713162.htm。此外，非常重要的一点是要把握进针的角度和深度。

主要步骤：

1. 样品：如果是打细胞，建议先固定小鼠，再准备细胞。以免时间长，细胞不匀。我一般吸一次细胞打一只小鼠，常用375 μl（胰岛素针15格）。注意速度不要太快，不要打入气泡，我一般准备17格的样品。

2. 固定小鼠：要固定好，不要让小鼠动来动去，不然打到一半针头可能会出血管。搓尾巴，左手食指和大拇指捏住尾巴1-2 cm处，中指抵住尾巴根部（放在根部下方），如此可使尾巴固定，注意尾巴要拉直，原因是使血管壁紧张。酒精棉球擦尾巴。尾巴与水平面约成15°，针尖斜面向上，约与尾巴成10°左右进针约针尖斜面的一半距离，改为平行进针。若进入血管，会有刺破感；若进入组织，阻力大，很难推针；把针若出血，说明扎破血管。谨记谨记，进针的角度和深度是一大关键！

3. 退针后马上用干棉球止血，因为残留的酒精进入伤口可能会引起溶血。

4. C57小鼠的左侧尾静脉比右侧要粗，因此一般打左侧，但也有小鼠右侧更好打。虽然小鼠尾静脉越靠近根部越明显，但是可能跟尾巴远离根部组织相对薄一点有关，尾巴远端更好打。如果第一次没打进去，这一针已经刺激血管收缩了，我一般换一侧在比第一次进针的地方稍微靠上的地方再打，如果在靠下的地方打，样品会从第一次进针的地方漏出来的。从下往上打，如果始终打不进去，将该小鼠放到一边，10-20 min后再打，即使还是从尾巴远端开始打，一般不会漏液的。

5. 湿棉球的作用，不是为了使血管扩张。丁香园里有个朋友解释得挺好的，他说就像是是湿布擦带雾玻璃一样，为了看清楚血管的位置。

附件中，是初学尾静脉注射时，在园子里看了很多帖子，做了一些笔记，如有需要，可以看看。祝一切顺利！