蛋白以前表达非常好，现在突然不表达了，向前辈们请教！
发布于 2017-04-26 · 浏览 3066 · IP 北京北京
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载体是pET-28a,原核蛋白。13年表达非常好，保存质粒和菌株。16年上半年重新活化菌株，表达也非常好。最近重新活化菌株，竟然无表达。重新转化质粒，还是无表达！
IPTG阳性对照没有问题。
感受态BL21阳性对照没有问题
质粒双酶切鉴定没有问题。
现在急得夜夜失眠啊，摸索不同的诱导条件，30度，37度，不同的IPTG浓度和OD值均没有表达。
有遇到同样问题的同行人吗？咋解决的？或者有一同拼在蛋白表达纯化路上的前辈多指教！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3066
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