求高手指导~包涵体蛋白纯化了3个多月了，没有一点进展

求前辈指导~

图示：从左往右分别是，maker，包涵体使用8m尿素溶解超声后离心的总蛋白，流穿液，洗杂液，洗脱液1（咪唑为200mM）,洗脱液2（咪唑为400mM），后面四ml都是分别用500mM咪唑分别洗脱的下来的。。流穿液和洗杂液中咪唑浓度都是20mM，ph为8.5。。洗脱液中杂蛋白超级顽固啊，目的蛋白掉它也掉，目的蛋白不掉它也不掉、、、请各位帮我出出主意啊，晕死了！