皮层神经元nse荧光染色，只有细胞核染上色
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求助各位大神，我刚刚开始做免疫荧光，用的proteintech的单克隆nse抗体（1:20,1:50,1:100都试了，说明书推荐是1:20至1:200）4°过夜，二抗是碧云天fitc（1:50,1:100），1小时到1个半小时，拍照时除了dapi清晰可见，绿光一点点也没有，曝光20多也没有，连特异性染色都基本没有，我提的皮层神经元，镜下可见明显的特征，请问这是怎么回事？一试过3次，做了10张片子，没有一点点绿光
