【求助】七次跨膜蛋白的提取和IP

大家好，目前在做的课题是想找一个七次跨膜蛋白的相互作用蛋白。希望能用过表达这个蛋白的肿瘤细胞做pull down然后找差异性条带去做蛋白质谱。现在就在提取的步骤被卡住了。之前做western的结果也非常不如意，杂带多且弱，背景容易高，增加上样量到150ug也没有用，一直以为是抗体不好，换了两个抗体；后来就改用加了flag标签的质粒做转染，但是pulldown以后用flag抗体依然检测不到清晰的条带。
在网上查了很久，有人说要用试剂盒，有人说要先拿到细胞膜 pellet，有人说七次跨膜蛋白很难提取就连有些提膜蛋白的试剂盒都办不到…… 还有，查到的大部分提膜蛋白的是从细菌或者酵母中提，从细胞中提的比较少被谈到。麻烦有从人肿瘤细胞中提取膜蛋白以及做pull down的前辈们传授一点经验吧，已经折腾一年了，再搞不定就没法毕业了呜呜呜……
恳请有大侠出现，于百忙之中伸出援手，帮助一下这个可怜的小姑凉~~提供可行的方案，介绍适合的试剂盒，或者提供合用的裂解液配方，等等等等，都热烈欢迎！能提供有效信息的，每人都有丁当赠送哟~~~非常感谢！