(技术讨论帖)关于生物反应器乳酸和pH的讨论
小弟最近在做5L生物反应器培养CHO-S细胞表达单抗,接种3天后检测乳酸发现已经有3.0g/L了,之后乳酸浓度一直升高,最高是7.0g/L,而且细胞密度也比较低(5*10^6),另外培养基pH下降比较快,进碱量比较多。培养条件:转速80rpm,溶氧50%(氧气校正的溶氧电极),空气氧气混合进气调节pO2,pH7.0,碳酸氢钠和CO2调节pH。之前做摇瓶实验的时候,接种第三天乳酸浓度是2.0g/L,之后持续降低,到培养结束后基本为0,培养过程中没有用碱调节过pH。
问题:(1)摇瓶和生物反应器中乳酸的变化差异很大,是什么原因造成的(个人猜测是pO2和pH有关,由于摇瓶没有在线检测pO2和pH,所以不知道摇瓶培养过程中的参数);如何在生物反应器中减少乳酸的生成(与摇瓶一致),个人试过低糖培养,效果不是很好,还试过HIPDOG,效果还行,但表达量下降了。
(2)在生物反反应器中pH下降比较快,进碱量多的问题怎么破?我的做法是持续通空气,降低CO2在培养基中的溶解,pH下降相对慢一点,有木有其他办法?因为碱量多了渗透压升的很快。
(3)大家做生物反应器培养CHO细胞时,培养参数是什么(感觉看的文献参数都差不多,实际培养时是不是这样的?)
谢谢大虾们能够解答和给出建议,另外有没有推荐看生物反应器方面的文献或者书,最近找到CELL CULTURE
TECHNOLOGY FOR PHARMACEUTICAL AND CELL-BASED THERAPIES这本书,还木有看。。。
最后编辑于 2015-12-02 · 浏览 2.9 万