细胞培养课堂丨生物反应器悬浮细胞培养操作视频

生物反应器悬浮培养技术在规模化生产、提高单位产量、细胞的高密度培养、高密度表达、简化生产工艺、降低生产成本和保证大规模生产的产品质量等方面，表现出良好的应用价值，并在生物制药行业普遍应用。

为此，我们拍摄了一组视频，详细讲解了生物反应器悬浮细胞培养的全过程，希望对你有所帮助！

生物反应器悬浮细胞培养操作步骤详解

一、上罐前的准备

1. 将培养好的细胞混合在一个摇瓶内

2. 轻轻晃动摇瓶，充分混匀细胞

3. 取1ml细胞悬液进行细胞计数

 二、上罐操作

1. 将细胞倒入接种瓶内，并安装无菌两通管

2. 将接种瓶与反应器进液管无菌连接

温馨提示：小心火焰，防止烫伤

4. 用压缩空气将接种瓶中的细胞转移至反应器内，同时轻轻晃动摇瓶，防止细胞沉降结团

5. 取出碱液瓶并消毒瓶身

6. 将碱液瓶与反应器进液管无菌连接

温馨提示：小心火焰，防止烫伤

7. 用蠕动泵夹住碱液管道，松开碱液管道上的止血钳，确保碱液管道畅通

8. 开启蠕动泵，让碱液充满管路

温馨提示：注意蠕动泵旋转方向

9. 在线取适量反应器内的细胞悬液样品进行检测

温馨提示：共取两管样品，第一管废弃，只保留第二管样品；液体单向流动，只出不进。

10. 取样后在取样管末端浸入75%的酒精

12. 测量样品的pH值，并进行细胞计数

13. 在控制面板上进行pH控制

14. 检查氧气压力表示数为0.1MPa左右

15. 在控制面板上进行溶氧控制设置。或根据需要选择溶氧模式（单一模式、单氧模式、混合模式等）

三、细胞悬浮培养

1. 以动物细胞为例，温度设置为37℃，溶氧为40%，pH值为7.0左右进行细胞培养

2. 每24小时在线取样一次，进行细胞计数和pH值测量

四、下罐操作

1. 关掉控制面板上的所有的自动控制

2. 用止血钳封住深层进气通道，从尾气冷凝管通入0.05MPa左右的压缩空气，将罐内培养液排入废液桶（瓶）

3. 断开电极与控制柜的连接

4. 将反应器罐体及所有组件推去洗涤间清洗

5. 用纯化水清洗反应器罐体、桨叶及其它组件，并用纱布擦拭

6. 清洗完成后，罐体内装满0.1M的氢氧化钠静置过夜。