【求助】求助以基因组DNA为模板进行Real-time PCR实验的相关问题
这个帖子发布于 9 年零 358 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
| 求助以基因组DNA为模板进行Real-time PCR的相关问题！ 之前做过Real-time PCR的实验，以前的思路是在RNA水平检测某基因的表达，提取总RNA进行逆转录，以cDNA为模板进行Real-time PCR，通常以GAPDH为内参，采用2-△△CT进行相对定量。 现在想用基因组DNA为模板，检测某基因的扩增（拷贝数的增加）情况，因为考虑到如果提取RNA再逆转录回到cDNA进行检测，就多走了弯路，不够直接。 现在由这个设想引出几个问题： 1、如果采用基因组DNA为模板，内参应如何选择？还可以选择GAPDH吗? 2、需要采用什么方法进行处理数据，还可以采用2-△△CT法吗？ 还请大家不吝赐教！多提意见和建议！麻烦有这种实验经历的大侠详细介绍下！多谢！ |
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