【求助】甲酰胺-伊文思蓝检测BBB通透性疑问

各位实验老师师兄师姐大神们你们好。最近按照文献上伊文思蓝检测BBB通透性的实验方案进行实验，遇到许多问题，希望大神们给予指导。
1、有文献建议使用三氯乙酸提取伊文思蓝，也有用甲酰胺的，到底选哪种试剂？
2、甲酰胺提取伊文思蓝，浸入其中的脑组织是否需要匀浆？我匀浆后，10000rpm/min 离心20min，却无法获得上清液，液体呈浑浊状。不匀浆，60度浸泡脑组织24小时的条件有无问题？
3、要绘制伊文思蓝的标准曲线，含伊文思蓝的标准液如何设置浓度分布，溶剂是否选用甲酰胺？