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【求助】transwell细胞共培养的几个问题

最后编辑于 2022-10-09 · IP 辽宁辽宁
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这个帖子发布于 10 年零 194 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人最近在做巨噬细胞与肿瘤细胞共培养的实验,实验分为肿瘤细胞单独培养和巨噬细胞与肿瘤细胞共培养组,两组均加入抑制肿瘤生长的药物,目的在于通过实验证明肿瘤细胞在药物作用下可以刺激巨噬细胞分泌某些因子来保护肿瘤细胞。
问题1:我的实验过程是将肿瘤细胞计数后铺于6孔板,待24小时细胞贴壁后用无血清培养基饥饿处理24小时,之后将肿瘤细胞分为两组,一组为肿瘤细胞单独培养组,一组加入巨噬细胞即为共培养组。这两组同时加入药物作用24小时后收取肿瘤细胞做MTT,观察肿瘤细胞对该药物的IC50是否有变化。另外还想收取这些肿瘤细胞的蛋白做WB来检测一些标记蛋白含量的变化。问题是如果用无血清培养基培养肿瘤细胞,再加上药物作用后收取的细胞很少,细胞基本都死掉了。如果将它们继续用无血清的培养基培养是否还能增殖、传代?是否可以用含有血清的培养基来做后续的MTT和WB?
问题2:如果实验中想在肿瘤细胞中加入某种因子,是否也一定要用无血清的培养基。
想了好久也不知该如何解决!谢谢大家啦!!!


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