苯甲酸的测定——紫外分光光度法

纯净的苯甲酸钠在225 nm处有最大吸收峰，它的吸光度与浓度的关系符合比尔定律。
1．主要仪器
紫外光分光光度计。
2．主要试剂
①酚酞溶液：取1酚酞溶于100 mL95％乙醇中。
②85％正磷酸。
③重铬酸钾(0．2 mol·L ^-1)：溶解4．9 g重铬酸钾于水中，稀释至500 mL。
④硫酸(2 mol·L ^-1)：稀释66．5 mL浓硫酸至500 mL。
⑤苯甲酸钠贮备液（100 mg/L）:称量经过干燥的苯甲酸钠100mg(105℃干燥2 h)，加100 mL0.l mol·L ^-1氢氧化钠及适量的水溶解，定量转于1 000 mL容量瓶中，以水定容至刻度，摇匀。
⑥苯甲酸钠工作液(20 mg／L)：稀释20 mL贮备液至100 mL。
3．标准曲线的绘制
移取苯甲酸钠工作液0、l、2、3、4、5 mL于6个10 mL容量瓶中，各加人l mL0．1 mol·L ^-1氢氧化钠溶液并用水定容，在225 nm处测定吸光度。以吸光度对浓度制成标准曲线。
4．样液中苯甲酸钠的测定
①样液的制备：准确称量5 g左右果汁于100 mL容量瓶中，加50 mL水，以酚酞为指示剂，以0．1 mol·L ^-1氢氧化钠溶液调整至呈粉红色，再以水定容。
②空白液的制备：移取20 mL上述中型样液(应含苯甲酸钠在200～1 000?g，否则增减所取的mL数)于250 mL蒸馏瓶中，加20 g无水硫酸钠及30 mL水，连接蒸馏设备(以50 mL容量瓶、内置5 mL0．1 mol·L ^-1氢氧化钠溶液为吸收瓶)。以大火加热，调节火力，使馏液为10 mL时所需的时间约为10 min。收集馏液35 mL后停止蒸馏，以水洗净冷凝管，然后以水定容此接收瓶。
③比色液的制备：方法与空白液制备相同，只是在加20 g无水硫酸钠以前，要加1 mL正磷酸。
④样液的比色：以空白液为对照，于225 nm处测定吸光度，从标准曲线可得苯甲酸钠的浓度。
5．计算
苯甲燃(g·kg ^-1)=[X*(V/ V^/)/m]*1000 式中：m——样品质量，g；
V——萃取m g样品所得到的溶液体积，mL；
V^/——比色用的溶液体积，mL；
X——V^/毫升中含苯甲酸钠的重量，g(从标准曲线查得)。
6．说明
用乙醚提取时，不要上下振荡以免生成乳状液，不易分离，应旋转分液漏斗进行提取。如形成乳浊液，可用一玻棒搅拌，或对乳状液进行一、二次上下的激烈振荡，或用离心机分离；提取液被吹干后，最好放置过夜，以排除可能存在的醋酸的干扰，否则结果偏高。