【交流】抗体标记中的困惑
各位战友有没有做过标记的,或者有经验的,小弟在这里请教了: 问题1:关于标记的摩尔比的问题,是不是每种抗体和HRP的摩尔比时不同的呢?如果我有一个抗体摸到了合适的摩尔比那么换个抗体是不是要重新摸索,希望有经验的战友帮忙解答下。 问题2:也是最近一直困惑我的,我的抗体标记好HRP用它的抗原包被板检测效价(直接法),效价还是不错的最好可以到5万。但是用它配对的抗体做夹心法检测的时候效价就小的可怜,效价100都达不到1.0的OD。中间夹的抗原浓度已经是蛮高的了。我一直弄不懂这是为什么?多次重复结果一致,除了我的抗体间配对效果不好这种解释外,还有其他的解释吗,希望有经验的战友多指点。 不方便的可以站内短信,咱相互学习 |