求教：3T3-L1前脂肪细胞的促分化
这个帖子发布于 20 年零 218 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
您好，我是中山医一研究生，课题所需要培养3T3-L1细胞，并促分化为成熟的脂肪细胞。但是按照文献上的方法促分化分化不出来，现向各位同道高手求教。
本人3T3-L1细胞株是购自北京中国医科院细胞中心。订购了sigma的IBMX货号是I5879，胰岛素用诺和灵R，地塞米松用地塞米松磷酸钠，胰岛素和地塞米松都是病房的。按照文献上0.5mM IBMX(222.24mg/L),1.7μM insulin(9.7461mg/L),1μM dexamethasone(0.51641mg/L)配了促分化的液体。促分化两天再换用普通高糖DMEM完全培养基。但是促分化过程看不见细胞有脂滴的聚集现象，而且细胞长得特别快，促分化两天已经长满瓶底；换用普通高糖DMEM完全培养基培养六天后细胞仍未见分化，且大片脱落。
配促分化液的时候发现IBMX水溶性比较差，搅拌了三个小时才完全溶解，而且配完以后发现烧杯等玻璃容器滑滑的，用去离子水泡一晚后，水上漂浮一层油性东西，怀疑IBMX丢失。
现想问一下各位同道我的做法是不是哪里出错了？该细胞株促分化有什么要注意的方面？有没有什么好的建议？
非常感谢各位的帮忙！
本人3T3-L1细胞株是购自北京中国医科院细胞中心。订购了sigma的IBMX货号是I5879，胰岛素用诺和灵R，地塞米松用地塞米松磷酸钠，胰岛素和地塞米松都是病房的。按照文献上0.5mM IBMX(222.24mg/L),1.7μM insulin(9.7461mg/L),1μM dexamethasone(0.51641mg/L)配了促分化的液体。促分化两天再换用普通高糖DMEM完全培养基。但是促分化过程看不见细胞有脂滴的聚集现象，而且细胞长得特别快，促分化两天已经长满瓶底；换用普通高糖DMEM完全培养基培养六天后细胞仍未见分化，且大片脱落。
配促分化液的时候发现IBMX水溶性比较差，搅拌了三个小时才完全溶解，而且配完以后发现烧杯等玻璃容器滑滑的，用去离子水泡一晚后，水上漂浮一层油性东西，怀疑IBMX丢失。
现想问一下各位同道我的做法是不是哪里出错了？该细胞株促分化有什么要注意的方面？有没有什么好的建议？
非常感谢各位的帮忙！
