【讨论】ELISA法测定细胞培养液中的炎症因子：OD值很低，分析原因。

我用ELISA试剂盒检测细胞培养液中的IL-1beta，结果：

问题1）无论正常对照组还是LPS诱导炎症反应组的细胞培养液中的IL-1beta浓度都较低，标准曲线正常。

问题2）正常对照组的IL-beta有时比LPS刺激组的还高。

问题3）所有检测结果基本上处于标准曲线上的低浓度区域，即线性不是太好的区域。好像没有处于标准曲线的中间位置。

可能的原因有那些呢？

我的实验条件：

1）我的细胞BV-2小胶质细胞接种的6孔板中，30万/孔。10%FBS+DMEM，1ml/孔。细胞贴壁24h后，发现细胞已经长得比较满了，再加药处理24h。

2）吸取上清培养液，用ELISA试剂盒测定其中的IL-1beta，每孔加入150微升细胞培养液。

另外，我看有人做实验时，采用96孔板，每空10的5次方个细胞，就是每空10万个细胞，这是不是太多了？可能吗。

再有，含有10%的血清的培养基对ELISA检测结果是否有影响，是否应该用低血清培养液做该实验？