【原创】关于western blot中大分子量蛋白表达

我用western blot做的P糖蛋白的表达，P糖蛋白是一种膜蛋白，分子量在170KD，属大分子量蛋白，而我的参照基因选择的是β-actin，分子量是43KD。
我觉得需要注意的应该就两方面：
①配分离胶：因为P糖蛋白是大分子量蛋白，为了使大分子量蛋白能顺利进入分离胶，我选择的是6%的分离胶。效果不错。

②转膜：之前用的电流是膜面积×1，1.5h，效果不是很好，后来换成电流为膜面积×2,2h后，每个样本都出来了，很清楚。虽然电流加大，时间延长了，在这个时间里，丝毫不用担心actin会被转走，我的actin出来的也很清楚。

其他程序按步骤走就可以。拙见，望批评指正！