【建议】Western blot 不常规而实用的做法

Western blot 不常规而实用的做法1、简单而有效的抗体洗脱液配方：0.2mol/L NaOH;
使用方法：蒸馏水洗两遍，5min/次；洗脱液摇床洗1次，5min；最后蒸馏水洗两遍，5min/次。

2、PVDF膜省时省封闭方法：仔细阅读Millipore PVDF膜的说明书，上面有介绍快速免疫学检测的方法，其中之一是可以省略封闭步骤，则可省1小时乃至2小时。方法如下：转印完成后，将PVDF膜放入甲醇中，静置10秒，取出放于滤纸上风干，等待10-15min，使膜完全干燥，然后直接孵育一抗，室温或过夜均可。其他步骤同常规。

以上两种方法均经多次实验验证有效.洗脱液效果很好;干燥膜孵育抗体后发光背景淡，条带清晰，甚至好于封闭后所得结果。特在此分享，建议尝试。