请问这样提蛋白会不会造成蛋白的降解?lgr1982最后编辑于 2022-10-09 · IP 上海上海2070 浏览这个帖子发布于 20 年零 250 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。培养出来的细胞直接用PBS洗下来,加等量的2*sample buffer,用100度煮五分钟使其变性即可,然后每次用之前将蛋白再煮一次。这好像是一种最简单的提蛋白的方式,带我的小老板就用这种方式提蛋白,他觉得用lysis buffer 太麻烦。开始的时候蛋白质量还可以,但是,我现在每做一次都发现蛋白的量越来越少,信号从很强变得越来越弱,直到今天,我用的所有的条件都和以前一样的,就什么信号都没有了,蛋白只用过四次。而且比较奇怪的是,这种买的sample buffer煮了以后会从蓝色变成黄色,有问题吗?谢谢您的答复!