【求助】三重染色，MAP2、TUNELstaining、DAPI 实验步骤问题请教

请问，细胞免疫荧光MAP2、TUNEL标记染色及DAPI染核 三重染色要怎么做呢？
标本：神经元细胞
目的：要让MAP2、TUNEL标记染色、及DAPI染核出现在同一张图片上。
这样就要进行三重染色。不知道要怎么做呢？
问题1：TUNEL染色，标本是体外培养的细胞，一定要做细胞爬片吗？直接在培养皿中可不可以做呢？
问题2：细胞免疫荧光MAP2与DAPI染核双重染色的步骤我知道，那么要再标记TUNEL，是先做TUNEL的全部流程，然后再做免疫荧光，然后再染核吗？:8)固定、通透这些步骤可不可以同时进行呢？他们相互之间有什么影响呢？
谢谢！！！