【求助】蛋白的质谱分析
这个帖子发布于 16 年零 105 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好
我有一个蛋白，纯化之后出现两个条带，经western blot杂交，都可以杂上，而且可以肯定不是提前终止造成的，因为我两端都加标签纯化的
看到一篇文献，他们做的蛋白有类似现象。他们拿去做maldi-tof，根据两个条带的m/z差，软件推测其中大的一个可能是被糖基化的。最后他们进一步用液相色谱质谱联用，得到具体糖基化位置和糖基的结构。
我查了很多文献，都是说把某个蛋白先用胰蛋白酶切，再上质谱，得到指纹图谱。但我上一段里边讲到的文献貌似是将整个蛋白拿去做的质谱（大概16-17kd）。我是想问，到底可不可以将整个蛋白不经酶解拿去做质谱（maldi tof）呢？对大小是不是有限制呢？我的大概30kd左右。
大家可能会问我干嘛非要全长拿去做呢。我是想像刚才提到的文献那样，先看看二者m/z差别，看是否确实有糖基化存在。而蛋白的身份，我觉得western blot还是足够验证了。
不知道我的想法是否正确，请各位指教指教。。
我有一个蛋白，纯化之后出现两个条带，经western blot杂交，都可以杂上，而且可以肯定不是提前终止造成的，因为我两端都加标签纯化的
看到一篇文献，他们做的蛋白有类似现象。他们拿去做maldi-tof，根据两个条带的m/z差，软件推测其中大的一个可能是被糖基化的。最后他们进一步用液相色谱质谱联用，得到具体糖基化位置和糖基的结构。
我查了很多文献，都是说把某个蛋白先用胰蛋白酶切，再上质谱，得到指纹图谱。但我上一段里边讲到的文献貌似是将整个蛋白拿去做的质谱（大概16-17kd）。我是想问，到底可不可以将整个蛋白不经酶解拿去做质谱（maldi tof）呢？对大小是不是有限制呢？我的大概30kd左右。
大家可能会问我干嘛非要全长拿去做呢。我是想像刚才提到的文献那样，先看看二者m/z差别，看是否确实有糖基化存在。而蛋白的身份，我觉得western blot还是足够验证了。
不知道我的想法是否正确，请各位指教指教。。
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