细胞技术与形态遗传

细胞技术与形态遗传

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dxy_ijei8zvq基础医学其他学科医学生

请问前辈，慢病毒在显微镜下能看得清吗，查到慢病毒有100nm大小，看起来很像是染菌了一样？

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NK体外培养

呵呵605临床诊断学其他学科医学生

现在想从健康人外周血分离NK进行体外培养，但是血常规分离的量肯定不够，请问一下大家有没有什么解决办法。体外扩增NK可以吗，只扩增数量？之前有帖子说体外富集pmbc，但是没有搜到这方面内容，请请问有没我朋友知道这个意思？#细胞版12月活动

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求助🆘大鼠成骨细胞ros1728

麻辣香香香郭

大家有靠谱的细胞库可以买到ros1728吗，急急急，在ATCC上查不到，又联系不上文献里的上海复旦大学细胞中心，有没有好心人可以给一个联系方式呀

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新手培养NK，没养过NK细胞，最近要养，求大神们指点下，该购买什么试剂耗材，用什么因子培养基，怎么培养，请好心人指点

liurongkun

没有养过NK细胞，最近要养，可是关于NK这个好久没关注过了，不懂该用什么培养基，实验耗材用什么，因子都有什么，如何操作一无所知，求走过路过的大神们好心相教，无限感激

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求助 MARC145细胞

How_ever_人体免疫学医学生

有人做PRRSV病毒实验用的marc145细胞有偿求助

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【资源共享】FCS Express 中文使用手册

wxmuhj

FCS Express 流式细胞仪的分析软件，对于初次使用的很有帮助。

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【原创】各位大侠快来看看我的hep-2细胞出了什么问题

扫尽尘嚣妇科医师

从中国医学科学院肿瘤细胞库买的hep-2细胞，传了两三次代以后发现许多杂细胞类似物，像是小细胞聚集成的团块，不知道怎么形容，请各位大侠帮忙看看，十分感谢！下面上图。

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请教AD细胞模型Aβ25-35溶解问题

医途繁花神经科医师

这次买了MCE公司的Aβ25-35 1mg，按说明书需 188ul DMSO溶解，再用培养液稀释后老化，但说明书上说DMSO溶解后浓度为5mM,但这样细胞培养用药时Aβ浓度明显超过0.5%，所以这次用了20ul的DMSO溶解，但加了培养基后可见明显絮状物，没有溶解好，请问大家怎么办呢，谢谢大家

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求助，这是什么细胞污染，一直分辨不出来

Cicade1017麻醉学其他学科医学生

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[求助]肠神经元原代培养

我想像风一样自由

请问有没有大神做过肠神经元原代培养，有成功的经验么，我按Jove上的方法做过好几次，感觉都没有提出来过，有没有人可以一起交流一下经验，感谢

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荧光标记多糖

互相讨论

最近我在用FITC标记多糖用于培养细胞，可是每次都不成功。具体是这样的：每次细胞都会整个显示绿色，不知道糖有没有被标记上，因此做了一个阳性对照，在细胞培养基里直接加FITC结果和标记多糖实验组结果一样，不知道是不是因为我的糖压根就没被标记上，求各位指点，我使用的方法是还原氨化反应给多糖末端加上氨基，再标记上FITC，难道是因为我这种糖不适合这种方法？

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【转帖】细胞培养技术资源总结

minge1986眼底病科医师

本内容需要回复后才能下载！本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除细胞培养技术资源总结细胞培养概述细胞培养常见问题细胞培养常用知识合集

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鱼肝细胞提取

lululala1212

请教一下，我提的是不是鱼的肝细胞呀，在96孔板里培养一周还是这样圆圆的，期间给它换过液，细胞也长得好好的。以下是我的提取的步骤1.取鱼的肝组织，用pbs清洗2.将组织剪碎，加入不含edta的胰酶，至于37度静置消化20min，并10min吹打一次。300目筛网过滤。滤液500rpm，3min离心3.用L15洗细胞沉淀，最后用含双抗和10%血清的L15培养基重悬细胞，并接种到96孔板中

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培养外周血单核细胞（注意是单核细胞，不是PBMC）

刘随新123

公司要我们做单核细胞的培养，不是PBMC，分离方法已经大概知道了，可是怎么培养一直找不到方法，各位大神救救我吧！

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【求助】求RNA免疫沉淀(RIP)的详细实验步骤

334642126泌尿外科医师

最近准备做RIP，在找相关的实验步骤说明。在网上下了一个Millipore的试剂盒说明书，但老板说要找一个中文的博士论文。在万方和中知上搜了好久仍没找到，急求高人赐予我文献！！

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【经验】干货——C2C12培养心得分享

RoseTiger运动医学科医师

最近文章都是在投，时间都花在了摸索实验上。废话不多说，直接进入主题——C2C12首先说明大概情况，我是从20年12月中下旬开始摸索C2C12的特性，期间也跟着论坛的经验做了不少预实验，但是分化一直不是太理想，最近才成功了一批，和大家分享。增殖培养基：高糖DMEM+10％FBS+1％PS分化培养基：高糖DMEM+2％马血清+1％PS遇到的最大问题就是分化不出来肌管我从三方面进行了纠正1.细胞的密度 2.分化液浓度 3.细胞的状态密度最开始看论坛，众说纷纭，于是我把手头的C2C12种植到了30 50 70 90的浓度用分化培养基培养，培养4天之后肌管没出来，倒是凋亡的细胞一片一片的。（后面看文献知

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Image J 插件安装（angiogenesis分析插件安装）

斑点狗狗

因为自己瞎弄了好久才搞定这个插件安装。。所以我觉得应该也有人需要。之前在园子里找了好久也没找到教程。所以自己做了一个。至于安装IMAGE J 园子里已经有帖子讲过了。大家自行找一下。这是MAC版的教程，windows我估计差不多。1.首先你需要安装好一个可以运行的image j,然后你会发现有的你需要的功能需要自己下载插件。2.然后https://imagej.nih.gov/ij/plugins/index.html这个网址下载你需要的插件。打开toolsets或者tools,因为我是做成血管结果分析所以我需要的插件在toolsets里。按照如下步骤复制所需插件的内容，自己建立一个txt.

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有奖直播 | 全光谱流式进阶：从原理、实验流程到应用优势

丁香实验已认证的机构号

流式实验难题多：样本自发荧光干扰强，弱阳性信号被淹没，如何有效区分？样本量很少，想测的指标很多，怎么在一管内完成所有指标检测？多色 Panel，实验分析复杂度高，结果准确性如何保证？如何避免数据处理差异性？为突破流式检测瓶颈，丁香园联合层浪生物将于 9 月 29 日 14:00 点举办主题为《全光谱流式进阶：从原理、实验流程到应用优势》的在线直播！直播围绕全光谱流式技术展开深度解析，结合真实案例分享实战经验，针对实操中的疑难杂症提供解决方案，助力您高效科研。报名直播有机会在直播互动中赢取保温杯、logi 鼠标、香薰加湿器、折叠包、U 盘等礼品。点击链接，立即报名：https://dxy.me/

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求助：JC-1流式数据分析

ZHLAT1008

本人刚刚接触流式，**大神指导JC-1的流式数据分析方法左图是我圈的细胞，右图根据阴性对照画了十字门，选了FITC和PE之后怎么统计红绿荧光比值呀？请大家指导一下，不胜感激啊

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药物处理乳腺癌细胞后，加入MTT后细胞形态

zhangjinjie86@163.com药师

各位前辈，我们做的是某化合物对MDA-MB-231细胞的体外抗增殖活性，药物处理细胞后，加入MTT之后，从镜下看了一下96孔板，细胞成了这种形态，正常嘛？

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破骨细胞诱导经验分享

Osteo_NJ口腔医学医学生

小鼠BMMs形态（TRAP染色）诱导5天可见体型较大的多个破骨细胞融合形成F-actin

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Imaris 9.5以上版本网上有破解版吗

SelX分子生物学医学生

需要用来分析一个shortest distance from to spot2，但是9.0版本没有这个功能，请问有无大神能帮忙细胞版12月活动

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【原创】关于THP-1细胞及其诱导为巨噬细胞

杨阳hysno1心血管内科医师

最近回答了园子里的战友一些关于THP-1细胞系及其诱导为巨噬细胞的问题，现在说明如下：A. 人THP-1巨噬细胞的培养人THP-1单核细胞用含有10% 热灭活胎牛血清和10U/mL青霉素、10μg/mL链霉素的RPMI1640培养液，在 37℃、5%CO2培养箱中静置培养，维持细胞数1×108/培养瓶左右。将传代培养的THP-1细胞稀释成1×106/ml，接种于35 mm培养皿中，于含100 ng/ml佛波酯（PMA）、0.3% BSA的无血清RPMI1640培养液中培养72h诱导分化。通过光镜进行形态学观察，鉴定细胞是否分化为巨噬细胞。附我之前诱导诱导巨噬细胞图片如下：附一张我闲来无事合

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求助THP1用PMA诱导M0

迷茫医学森临床医学其他学科医学生

THP1用100ng/ml的PMA诱导成M0，24h看飘着很多，贴壁的状态感觉也不太行，没换液继续培养到48h，感觉比24飘的更多，状态更差了，PMA对THP1有毒性吗

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Thp1细胞诱导不成功咋办？

Tshill心血管病学医学生

我最近在养Thp1细胞（rmpi1640+10FBS+1%P/S），后用100ng/ml PMA刺激36h仍然没贴壁，还是圆圆的，细胞状态倒是挺好。诱导成功后才表达的目的蛋白跑wb也基本上没有条带，有没有大佬知道哪出了问题？

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求助｜THP-1细胞怎么养？

黄连上清片病理学其他学科医学生

因为没有师姐带，按照别的细胞复苏的方式，复苏了冻存的THP-1，以下是我的复苏方式：800rpm，5min离心冻存管，弃上清，加1ml的10%1640培养基，吹打混匀后吸到6cm小皿里，补充3ml10%的1640培养基，放入培养箱培养这样应该是错误的复苏方式，想请问还有的救吗？看了大家的经验贴，THP-1是半换液，吸出一半的培养基，弃去，然后补一半的新培养基。想请问，吸出来的一半培养基，我能放新的培养瓶里，补一半培养基，接着养吗？

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胰腺癌KPC细胞，请问新的团块是什么情况？

jobsyu肿瘤妇科医师

请教园子里面的大神，胰腺癌KPC细胞，之前没有遇到过，细胞中出现了大团的东西，淡黄色，在细胞的上面，还挺多的。培养基并没有出现明显的浑浊。从底部往上拍照的照片，是因为皿里面有细胞，看着不干净。培养基是不浑浊的。照片是同一个视野、不同倍数的。4X，10X和20X。这是考虑污染吗？真菌污染？还是细胞增长期间的代谢废物？谢谢！！

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【求助】高手请进，Aβ25-35 活化N9细胞

lnzyxyqy2003

各位高手大家好！我现在在用Aβ25-35 作用于N9细胞上，想做MTT,可我老板说这个模型根本就不能做MTT,老板的说法是：Aβ25-35 作用与N9会使小胶质细胞增生，而MTT是反应细胞生存率的，根本是文不对题，我看过好多人在用药物，例如LPS作用于N9后，测定了 MTT,请问，究竟该不该测定MTT啊？请高手帮忙

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