【求助】10k的重组质粒线性化后如何纯化？
发布于 2007-08-04 · 浏览 6284 · IP 未知未知
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我构建的质粒是由ppic9k和我的目的片段组成（1400bp）。最终的重组质粒约为11000bp。我采用salI进行线性化，向gs115中转化。请问在线性化后，如何进行纯化?
用pcr产物纯化试剂盒应该不行，因为它只对4k左右的片段有好的纯化效果。
用割胶回收试剂盒？由于我酶切的比较多（好似酵母转化需要很多的线性化质粒），现在构建了200ul体系。如果割胶的话，我至少点4个孔。
我现在想请教一下各位战友，我能否不跑胶，直接拿酶切的体系，加上割胶试剂盒的bingding buffer，然后按割胶的流程回收？
还有，没有线性化的重组质粒转化进入酵母细胞后，该细胞能否在MD平板上生长？
谢谢各位战友！！
用pcr产物纯化试剂盒应该不行，因为它只对4k左右的片段有好的纯化效果。
用割胶回收试剂盒？由于我酶切的比较多（好似酵母转化需要很多的线性化质粒），现在构建了200ul体系。如果割胶的话，我至少点4个孔。
我现在想请教一下各位战友，我能否不跑胶，直接拿酶切的体系，加上割胶试剂盒的bingding buffer，然后按割胶的流程回收？
还有，没有线性化的重组质粒转化进入酵母细胞后，该细胞能否在MD平板上生长？
谢谢各位战友！！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 6284
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