【求助】怎样做细胞密度与OD值的关系曲线?然后选怎样的细胞接种密度?
想先确定最佳细胞接种密度
搜了园子里的文章,有以下几个问题,请各位懂的不吝赐教!谢谢!
1.有说要用完全培养液倍比稀释8种浓度梯度
我想问:为什么不能用等比?我考虑到是倍增的原因,那么浓度之间的差距一定要是倍数样的关系吗?我想倍比稀释的话,到后面,浓度之间的距离不是会很近很近吗?
我想做个8x105 4x105 2x105 1x105 8x104 4x104 2x104 1x104 8x103 4x103 2x103 1x103 这几个浓度梯度合理吗?因为不全是倍比,但是这些之间的浓度距离相差不大。
2.有说要培养24h,有的又培养5d
我想问:这个时间有固定要求没有?我想做个24小时的,因为这样细胞活力可能恢复了,另外做个培养7d后的,因为我的实验可能要涉及到这么多天,我取那个细胞浓度都在两条曲线的直线段。
因为我怕取的细胞数开始的时候是呈线性关系,但是未到七天就长满了,因为接触抑制等原因,不能线性反映细胞活力,所以我另外做个培养7d后的,取两条曲线都在直线段的细胞浓度,请问这样合理吗?
3.有人说取OD值在0.7左右的细胞数
请问到底有个什么样的取法?我做的是抗肿瘤的药,所以我觉得我要的细胞数一是在正常情况下7d内不能长满,还是要处于对数生长期,不能进入平台期;另外细胞数要尽可能多,因为不然会被药物抑制得没了。所以,我应该取个什么样的细胞数呢?
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2637