【求助】引物设计时如何加his标签(SOS、三跟鸡毛)yunpiaopiao77最后编辑于 2022-10-09 · IP 内蒙古内蒙古1.5 万 浏览这个帖子发布于 18 年零 179 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。各位大侠,小女子刚入门不久,老板让表达一段基因,做抗原用。我用的载体是pet 32a,酶切位点为Bamh I和 hind III,因为实验室有这两个酶,而且我的基因序列里没有这两个酶。但是,我有一些问题请教:1、融合蛋白对抗原性有无影响?2、如果我不做融合蛋白的话,是不是就不用his标签了?有什么方法可以进行后面的蛋白纯化?3、如果做融合表达的话,我怎么在引物设计时加上his标签呢?4、载体图谱上C端的his标签下面的密码子翻译的是Pro,怎么才能让它移码,变成his呢?5、基于这种情况,引物设计该注意什么呢?一只菜鸟,***各位大侠不吝赐教,老板现在都快吃了我了?他自己也不懂,也没有师哥师姐可以求助,只能来到这里求救!7 20 2